DNA kann sich vermehren. Das wusste man schon lange. Wie genau das geht ist aber überhaupt nicht so leicht ersichtlich. PCR Polymerase-Kettenreaktion ist eine Methode um die Replikation, die normalerweise in einer Zelle stattfindet, unter kontrollierten Bedingungen im Labor durchzuführen. Dazu wird die original DNA, welche die zu vervielfältigen Abschnitte enthält, sowie Primer und DNA-Polymerase zusammen mit Nucleotide in einem Thermocycler gegeben und mehrmals erhitzt und wieder abgekühlt.
Der Ablauf besteht im wesentlichen aus drei Schritten.
Im ersten Schritt wird die DNA auf 96° (Schmelztemperatur) erhitzt um die Doppelstränge zu trennen. Bei niedriger Temperatur richten sich im zweiten Schritt die (komplementären) Primer an der DNA aus. Die genaue Temperatur wird durch die Länge und der GC-Gehalt der Primer festgelegt. Schließlich wird im dritten Schritt bei erhöhter Temperatur mit Hilfe der DNA-Polymerase der Strang mit komplementären Base wieder aufgefüllt.
Werden die Schritte mehrmals hintereinander ausgeführt, vervielfältigt sich die DNA Kettenreaktionsartig.
15.03.2017
Biologie++ - PCR
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